發布日期:2022-05-30 點擊率:41
紫外可見光光度法的定性應用主要可分為兩種,一種是定性鑒別,另外一種是純度檢查,小編今天將用詳細的例子來給大家介紹一下:
1.未知物的定性鑒別
紫外可見分光光度法可用于對不飽和有機化合物,尤其是對具有共軛體系的有機化合物進行定性鑒別和結構分析,推測未知物的骨架結構。定性鑒別方法有兩種,一種是比較吸收光譜法,另一種方法是根據經驗規則計算吸收波長,然后與實測值比較。
(1)比較吸收光譜法
兩個樣品若是同一化合物,其吸收光譜應完全一致。在鑒定時,為了消除溶劑效,應將樣品和標準品以相同濃度配制在相同溶劑中,在相同條件下分別測定其吸收光譜,比較兩光譜圖是否一致(包括曲線形狀、入max、吸收峰數目、拐點及emax)。為了進一步確證,可再用其他溶劑分別測定,若吸收光譜仍然一致,則進一步肯定兩者是同一物質。
如果沒有標準物,則可借助各種有機化合物的紫外可見標準譜閣及有關電子光譜的文獻資料進行比較。常用的譜閣資料是薩特勒標準譜閣及手冊,由美國費城Sadtler研究實驗室編輯出版。
(2)經驗規則計算吸收波長法
當采用其他物理或化學方法判斷某化立物的幾種結構吋,可用經驗規則計算吸收波長,并與實測值進行比較,然后確定物質的結構。常用的經驗規則有Woodward-Fieser規則和Scott規則。
紫外吸收光譜只能表現化合物生色團、助色團和分子母核,而不能表達整個分子的特征,因此只靠紫外吸收光譜曲線來對末知物進行定性是不可靠的,還要借助一些其他方法如紅外光譜法、核磁共振波譜、質譜,以及化合物某些物理常數等配合來確定。
2.純度檢查
(1)雜質檢查
如果化合物在某波長下有較強的吸收峰,而所含雜質在此波長處無吸收峰或吸收很弱,雜質的存在將使化介物的吸光系數值降低;若雜質在此吸收峰處有比化合物更強的吸收,雜質的存在將使化合物的吸光系數值增大。這些都可作為檢查雜質是否存在的方法。但是,被檢查的化合物必須已經鑒別確證后,才能認為光譜數據或形狀的改變是由雜質存在引起的。如果化合物在紫外可見光區沒有明顯吸收,而所含雜質有較強的吸收,那么,有少量雜質就可以紫外可見分光光譜檢查出來。例如乙醇和環己烷中若含有少量雜質苯,苯在256nm處有吸收峰,而乙醇和環己烷在此處無吸收,即使乙醇中含苯量低達10mg/mL,也能從光譜中檢出。
(2)雜質的限量檢查
在食品、藥品等行業中,對有些雜質需有限量要求。例如腎上腺素的合成過程中有一種中間體腎上腺酮,在它還原成腎上腺素過程中由于反應不夠完全而帶入到產品中,成為腎上腺素的雜質而影響腎上腺素的療效。因此,腎上腺酮的量必須規定在某一限量之下。在0.05mol/LHCl溶液中腎上腺素與腎上腺剛的紫外吸收光譜有顯著不同,在310nm處腎上腺酮有吸收峰,而腎上腺素沒有吸收,可以利入max=310nm檢測腎上腺酮的含量。該法是將腎上腺素的制成品用0.05mol/LHC1溶液制成2mg/mL的溶液,在lcm吸收池中于310nm處測定吸光度A,規定吸光度不能超過0.05,相當于含腎上腺酮不超過0.06%。
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